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除虫菊组织培养探究

引言

除虫菊是一种多年生草本菊科植物,原产欧洲的南斯拉夫选尔马提亚群岛,现世界各地均有分布[1]。除虫菊足目前世界上唯一集约化种植的杀虫植物,从其花头中提取的除虫菊酯是迄今发现的不污染环境、对人畜等哺乳动物安全无毒、对害虫迅速击倒而不易产生抗药性、在植物和土壤中无残留的高效天然杀虫剂。云南省在20世纪3O,4O年代引种除虫菊,因各种原因未能形成产业,随着人们生活水平的提高及对环境保护意识的增强,对天然植物杀虫剂的需求量越来越大,除虫菊的开发利用作为一项重要的农业可持续发展技术将会得到各界重视。云南的生态和地理环境符合除虫菊的生长条件,是除虫菊的适宜种植区。由于长期以来,种植规模较小,缺乏高含量的优良品种,除虫菊的开发没有突破性进展[2]。

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1999年云南省从国外引进除虫菊优良品种种子3份,经栽培试验和成分分析,外引除虫菊不仅产量高,适应性强,抗病耐寒.且除虫菊酯含量均超过1.2%,但多年种植后出现含量逐年减低。某某市从98年农业结构调整后也开始规模种植,但都采用自留种繁育种苗进行大田种植,品种分化严重,只有5-10%的植株表现较好,产量和含量也逐渐降低。云南南宝植化有限责任公司于2007年9月24日与某某市农科所签订的《技术合作协议书》开展品种改良及配套栽培技术研究,除虫菊组织培养作为子课题,通过1-2年的时间,完善除虫菊组织培养技术,并应用到良种繁育及育种进程中。笔者参与并初步完成了该子课题。

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采用组织培养技术,可以有效地保存除虫菊的优良品种,并在此基础上进行优良品种的快速繁殖,以满足生产上的需要[3]。本文在已有关于除虫菊组织培养文献的基础上,利用用正交试验对除虫菊的快繁培养基进行了筛选,并在筛选的基础上做了进一步的优化试验,为除虫菊的种质保存和快速繁殖,并为扩大种植规模和产业化发展提供了科学的依据。

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1 材料与方法

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1.1 试验材料

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供试材料除虫菊宿根苗,取自峨山县南宝公司试验基地。取材两次,取材时连根挖起。将选取的外植体用软毛刷轻轻刷洗基部泥土,自来水冲洗10-15min,取下带腋芽茎段(3cm左右)及顶芽,然后用中性洗涤剂浸洗后用自来水洗净备用。

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主要以MS为基本培养基,根据生长进行调节,每个配方除了添加不同种类和浓度的激素外,还分别添加食用白糖3% ,卡拉胶O.4%,pH值为5.8-6.0。培养室温度22~28℃,光照强度40W日光灯,光照时间10h/d[4]。 paper51.com

1.2 试验时间及地点介绍

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试验时间2008年8月—2009年3月,试验地点某某市农科所试验室。试验室规模:试验室约100m3,有3台超净台,一间培养室,2个高压灭菌锅。非洲菊、彩色马蹄莲、芦荟、草莓等的组织培养已成规模化生产,另外根据需要,试验室还进行一系列的试验研究,在植物组织培养方面有丰富的经验、熟练技术和完善的设备。

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1.3 试验方法 copyright paper51.com

将上述材料在超净工作台上置于按设计好的方案进行消毒处理。首先在75 %酒精中浸泡30 s ,再放入不同浓度升汞溶液中(加3~5 滴吐温80)做不同消毒时间处理,之后用无菌水冲洗2-3次, 最后用无菌滤纸吸干。切下切取茎段腋芽和顶芽,茎段两端被药液所伤的部分切除,取1.Ocm长的茎段和顶芽接到事先准备好的初代预培养基上,每份培养基接1个外植体[5]。

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