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雪灵芝中环肽的薄层层析初步研究

目  录

引言………………………………………………………………………1 paper51.com

1.实验部分………………………………………………………………1 copyright paper51.com

1.1实验原理 ……………………………………………………………1

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1.2监测仪器及试剂 ……………………………………………………2

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1.2.1仪器 ………………………………………………………………2

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1.2.2试剂 ………………………………………………………………2        

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1.3实验步骤 ……………………………………………………………2 paper51.com

1.3.1粗环肽样品制备 …………………………………………………2 http://www.paper51.com

1.3.2手工制板 …………………………………………………………2

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1.3.3 薄层层析研究……………………………………………………2

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1.3.4 试样浓度的优化  ………………………………………………3

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1.3.5粗环肽试样的原位水解实验……………………………………3

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1.3.6环肽的确定………………………………………………………3

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2结果与讨论 …………………………………………………………4

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2.1 检测结果评估 ……………………………………………………4

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2.2 实验过程中存在的其它问题 ……………………………………4 内容来自www.paper51.com

2.3 氨基酸与茚三酮反应条件的讨论 ………………………………5

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结语……………………………………………………………………5

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致谢……………………………………………………………………6

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参考文献………………………………………………………………6 内容来自www.paper51.com

                  1.3.6环肽的确定 copyright paper51.com

此次点样所用的提取物的浓度为原样品浓度的1/4。将提取物点在两块板(板3和板4),将两块板置于氯仿-甲醇(8.5∶1.5)中展开后用电吹风吹干,在紫外光(λ=365nm)下观察,发现两块板中靠近展开剂前沿位置上都出现了翠绿色荧光带,中间位置出现棕黄色带,薄层板下端靠近样品点位置出现了一条蓝色荧光带。而后把两块置于110℃的恒温箱中用浓盐酸水解1~2h 后,取出冷却后在紫外光(λ=365nm)下观察发现棕黄色带子变浅,为淡黄色。翠绿色光带消失,出现在淡粉色带子,取出后再对板3进行一次二维展开,先用展开剂氯仿-甲醇(8.5∶1.5)展开后,等该展开剂挥发完后再用氯仿-甲醇-冰醋酸(8.5∶1.5∶4滴)展开,挥发掉展开剂后喷洒0.2%茚三酮丙酮试剂,放到烘箱中热干数分钟,如果酸水解后的板3和板4在一维展开后出现紫红色带时说明可能存在环肽。板3在二维展开后发现微显紫红色带且同一轴上显示多个紫红色或黄色斑点,表明此植物样品含有环肽成分。如果存在环肽则水解生成氨基酸,然后用碱中和氨基酸中的-NH3+。使之成为-NH2 (氨基),即N端显露出来。用0.2%茚三酮丙酮试剂显色,若存在氨基酸,反应后的显现紫红色斑点。 paper51.com

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